把貼附培養的細胞改放到低貼附培養板,隔天看到圓形團塊,就代表建立了可靠的三維模型嗎?還不能這樣判斷。團塊可能大小不一,也可能混有鬆散細胞。若各孔起始狀態不同,後續藥物反應的差異,就很難歸因於處理條件。
SPL Life Sciences 的 SPL3D™ Cell Floater 是低貼附細胞培養容器系列。本篇涵蓋原廠目前列示的 9 個貨號:培養瓶、培養皿及培養板。其中 34896、96 孔圓底板被原廠定位為單一細胞球體(spheroid)形成用途;不能把這項定位套用到其他型號。這項設計提供建模條件,並不保證任意細胞都會形成同樣大小、同樣功能的球體。
低貼附與圓底,改變了什麼?
一般貼附培養讓細胞在容器表面展開;低貼附表面減少細胞在底部穩定附著的機會,讓細胞之間的接觸與聚集成為可觀察的過程。34896 的圓底幾何則有助於將沉降的細胞集中;系列中的培養皿、培養瓶與其他孔型,不能據此預期每個容器只形成一個球體。這是對設計原理的科學解釋,並不是原廠公開的表面化學配方。
球體是否形成,仍取決於細胞種類、活性、接種狀態與培養環境。懸浮的細胞不一定互相黏合;外觀呈球形,也不能單憑照片稱為類器官。若研究目的涉及組織功能,還需以細胞標記、結構及功能終點驗證。
原廠規格
| 貨號/型式 | 面積/工作體積/包裝 |
|---|---|
| 711025 培養瓶,Filter Cap | Growth Area:25.00 cm² 工作體積:7.00 mL 包裝(套袋/箱):5/10 |
| 711075 培養瓶,Filter Cap | Growth Area:75.00 cm² 工作體積:25.00 mL 包裝(套袋/箱):1/3 |
| 26035 培養皿,35 × 10 mm;有握邊 | Growth Area:9.40 cm² 工作體積:3.00 mL 包裝(套袋/箱):10/20 |
| 26060 培養皿,60 × 15 mm;有握邊 | Growth Area:21.50 cm² 工作體積:5.00 mL 包裝(套袋/箱):10/20 |
| 26100 培養皿,90 × 15 mm;無握邊 | Growth Area:57.50 cm² 工作體積:12.50 mL 包裝(套袋/箱):10/10 |
| 39706 6 孔培養板 | Growth Area:9.60 cm² 工作體積:3.00 mL 包裝(套袋/箱):1/5 |
| 39724 24 孔培養板 | Growth Area:1.90 cm² 工作體積:1.00 mL 包裝(套袋/箱):1/5 |
| 39796 96 孔平底培養板 | Growth Area:0.33 cm² 工作體積:0.20 mL 包裝(套袋/箱):1/5 |
| 34896 96 孔圓底培養板 | Growth Area:0.66 cm² 工作體積:0.20 mL 包裝(套袋/箱):1/5 |
培養板的面積與工作體積為每孔數值;培養瓶與培養皿為每個容器數值。全部為 PS(聚苯乙烯),低貼附設計;原廠列 25°C 下保存期限 3 年,實際依當批效期標示。培養皿的尺寸為原廠 Type/Style 標稱值,不應當成蓋子或內部尺寸。
容器與孔內尺寸
| 貨號 | 尺寸(mm) |
|---|---|
| 711025/711075 | 產品頁外部及內部尺寸欄為「—」;設備適配另核對各款 TDS 圖面。 |
| 26035 | 內部:35.00 × 9.60 |
| 26060 | 內部:52.80 × 12.80 |
| 26100 | 內部:85.73 × 12.60 |
| 39706 | 外部:85.40 × 127.60 × 20.20;孔內:35.00 × 17.50 |
| 39724 | 外部:85.40 × 127.60 × 20.20;孔內:15.50 × 17.50 |
| 39796 | 外部:85.40 × 127.60 × 14.40;孔內:6.92 × 10.80 |
| 34896 | 外部:85.40 × 127.60 × 14.40;孔內:6.92 × 11.00 |
以上採原廠產品頁與 TDS 總表。現行連結的培養瓶、培養皿、培養板 TDS 均標示 Version 2、2018-11-20。原廠文件存在差異:培養板 TDS 第 3 頁將 96 孔板高度寫為 20.20 mm、孔尺寸寫為 6.40 mm;24 孔詳細表寫 15.60 mm,總表為 15.50 mm。培養皿 TDS 第 2 頁將 26100 寫為 500 片/箱,產品頁及總表則是 10/10。本文保留差異,採購包裝與設備相容性須向原廠確認。
原廠技術文件:培養瓶 TDS、培養皿 TDS、培養板 TDS。
依實驗終點選容器
需要把不同處理分開比較時,可依樣本量與讀值方式評估 6、24 或 96 孔板;單孔單球設計則優先評估 34896,而不是只看同為 96 孔。培養皿提供較開放的操作空間,培養瓶具有濾膜蓋;是否適合取樣、換液或收集球體,仍需在目標細胞與操作條件下確認。放大容器時不要只按面積乘上接種量,還要觀察聚集分布與回收損失。
200 µL 不是接種量,面積也不是細胞容量
工作體積描述培養液用量,不代表每孔可放多少細胞,也不是球體最大直徑。接種數相同時,初始存活率、聚集效率與後續增殖仍會改變球體大小。應分別記錄接種細胞數、活細胞比例、液量與培養時間。
表中的 Growth Area 是原廠列示的面積欄位,不能直接套用一般貼附培養的滿盤細胞數。對單球模型,更有用的品質終點是每孔球體數、直徑分布、圓整程度及存活狀態。規格描述容器,品質檢查描述模型;兩者回答不同問題。
培養液中的名目藥物濃度,也不等於球體每個位置的實際暴露量。傳輸、細胞攝取與反應時間可能共同影響讀值。研究設計上應固定球體成熟時間及大小範圍,再解讀處理後的變化;不能只因三維組的訊號較高,就判定具有較高抗藥性。
三種具體研究應用
建立可比較的細胞球模型
以單一細胞株建立接種數與成球狀態的對照,可先測試不同起始密度,追蹤每孔是否形成單一球體。保留未處理組、一般貼附培養組及相同時間的影像;將散開、多球或偏離尺寸範圍的判定標準事先寫清楚,避免看完結果才排除孔位。
比較藥物處理下的模型反應
對已穩定形成球體的腫瘤細胞模型,可設計濃度梯度並配合溶劑對照。代謝型檢測反映的是試劑反應訊號,不可直接當作活細胞計數;應加入背景孔,確認試劑能在球體條件下適用,並以形態或其他存活終點交叉檢查。這是實驗設計建議,沒有宣稱本板可預測患者療效。
觀察多細胞組合的空間變化
將不同細胞類型共同培養,可觀察聚集、位置分布及上清液指標。單一細胞培養對照、起始混合比例和追蹤染劑對照都很重要;整孔訊號增加,未必代表每種細胞同步增加。成像前也須確認圓底、光學路徑與設備焦距相容,必要時驗證轉移步驟對球體完整性的影響。
文獻與原廠測試能支持到哪裡?
Xiao 等人(2023),Journal of Translational Medicine 21:771 使用 SPL3D Cell Floater 培養板研究頭頸部鱗狀細胞癌共培養模型,包含 FaDu、纖維母細胞、THP-1 與另一隔室中的 HUVEC。方法提到 6 孔及 96 孔板,未列出 34896 貨號。這是系列產品使用證據,不能當作每個貨號的直接驗證,也不是品牌間優越性的比較。
原廠 96 孔圓底 Bench Test Report 明列 34896,使用 L929、HeLa、HT-1080,於每孔 3,000 細胞、48 小時條件評估球體。這是原廠測試條件,不是所有細胞的建議接種量。文件標頭 SP BTR-202609 與頁尾 2013 年日期並存,版本沿革需確認;本文不引用圖形估讀數值,也不延伸成普遍效能保證。
再現性檢核
- 樣本歷史:記錄細胞來源、傳代數、鑑別與黴漿菌檢查、起始活性。
- 操作變因:固定分散方式、接種混勻與加液速度;記錄操作者及換液時球體流失情形。
- 試劑準備:保留培養液、血清與添加物批號,核對藥物溶劑及配製時間。
- 儀器設定:記錄培養環境、顯微鏡倍率、焦平面與曝光,使用一致的影像判讀規則。
- 批次追溯:保留板材貨號、批號、有效期限與當次引用文件版本。
- 品質終點:統計成球孔比例、每孔球數、尺寸離散程度及存活指標,保存排除孔位的理由。
安全與研究用途限制
本系列僅供研究,不用於臨床診斷或治療。細胞與培養廢棄物應依所用材料的生物安全要求處理;涉及人源材料時須符合機構倫理與來源管理規範。板材並未取代無菌操作,也不包含細胞、培養液、培養設備或讀值儀器。
實際選型時,先決定終點是單球形態、藥物反應,還是細胞間互動,再確認細胞能否在這個條件下形成可重複的模型。容器規格是起點,模型驗證才決定結果能回答什麼問題。
SPL 原廠產品頁、上述 TDS、原廠測試及 DOI 文獻查閱於 2026-10-12。尺寸、26100 包裝差異與測試文件日期仍待原廠確認;實際供貨依當批標示。本稿未主張臨床用途或優於其他品牌。



